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斑马鱼是一种幼型热带鱼类,身体呈纺锤形,全身布满多条深蓝色纵纹。雌鱼一年四时均可排卵,每次排卵可多至200余枚。斑马鱼体表受精、体表发育,因为其胚胎透后,因而整体发育历程均懂得可见。斑马鱼受精约120h后,各个结构与脏器即已发育统统。受精约3个月后,可到达性成熟。受精约5个月后,可到达体成熟。2005年斑马鱼的全基因组已杀青测序,2013年英国的Sanger筹议所杀青了斑马鱼的参考基因组测序。筹议职员正在此本原上对比了斑马鱼与人类基因组的异同,并实行了体系的全基因组阐发,深切解析了斑马鱼编码基因的功效。筹议涌现,约71.4%的人类基因正在斑马鱼中均可找到起码一个同源基因,约69%的斑马鱼基因正在人类中也可找到起码一个同源基因。除此除表,正在心理构造、卵白功效、细胞内部的信号通途等方面,斑马鱼也出现出与人类极高的相仿性。斑马鱼举动一种介于细胞与哺乳动物之间的新型脊椎动物形式生物,正在听力筹议范畴具有宏壮的潜力。以其举动实习动物,有帮于科研职员对药物或化合物的耳毒性及耳毒性维护活性实行高通量的急速筛选评议。
斑马鱼的听觉器官合键由内耳、韦伯氏器与侧线体系构成。成年斑马鱼的内耳包括3个耳石器官(椭圆囊、听壶、球囊)和3个彼此笔直陈设的半规管(前、后和程度半规管)。椭圆囊和3个半规管配合组成斑马鱼的前庭体系,该体系合键担当庇护机体的均衡,且对重力加快率极端敏锐,听壶与球囊则合键担当听觉的变成。正在斑马鱼3个耳石器官的内部,各有一块加厚的区域,称为“囊斑”,相当于哺乳动物内耳中的柯蒂氏器(Corti’s organ)。斑马鱼的囊斑由麇集的感受毛细胞和声援细胞构成,两种细胞彼此断绝,穿插陈设。内耳中的感受毛细胞是一种特化的上皮细胞,能够感应声波的呆板振动。当表界的音响刺激以呆板振动的方法通报至内耳感受毛细胞时,感受毛细胞顶端的纤毛会产生弯曲,继而激发纤毛膜离子通道的怒放,导致膜的去极化,神经递质随即从感受毛细胞底部开释。此时,表界的音响刺激即由呆板振动转换成了可被听觉中枢识其它电信号。
韦伯氏器是斑马鱼前线几个椎骨产生异变变成的一组拥有特定功效的骨片,担当将鱼鳔与内耳中的球囊彼此衔尾。当表界的音响刺激鱼体时,鱼鳔能够巩固声波的呆板振幅。随后,经由鱼鳔放大的声波通过韦伯氏器可通报至球囊中的感受毛细胞,从而最终爆发听觉。通过韦伯氏器,斑马鱼能够感应到高频率、低强度的音响。
侧线体系是水生脊椎动物特有的皮肤感受器官,能感应较低频率的战栗,拥有限度趋流向的定位效力,同时还能协帮视觉测定遐迩物体的地位。斑马鱼的侧线体系征求两种呆板感应器,分歧是位于皮肤表貌的神经丘以及位于皮肤下侧线管内的管道神经丘。神经丘是斑马鱼侧线体系的基础功效单元,每个神经丘中心均包括一簇受神经独揽的感受毛细胞,其功效合键为探测低频振动和个别水流,调控逃避、进修和捕食等行径。斑马鱼的侧线处感受毛细胞正在构造、功效、基因调控和对耳毒性药物的反响等方面,均与人类内耳感受毛细胞万分相仿。当斑马鱼受精约第5d时,其侧线神经丘处的感受毛细胞即已发育统统。除此除表,因为片面神经丘毛细胞位于斑马鱼皮肤表貌,因而其万分便于活体调查或干涉。截至目前为止,斑马鱼的侧线神经丘已寻常利用于毛细胞的发育、再生和听觉贫穷等筹议当中。
耳毒性药物是指其毒副效力合键损害听觉体系,中毒症状为耳鸣、眩晕、耳聋和均衡失调等的一类药物。目前因为贫乏轻巧而有用的耳毒性评议模子,因而临床上同意上市的药物大大都缺乏耳毒性的评议目标。
氨基苷类抗生素是一种由氨基糖与氨基环醇通过氧桥衔尾而成的苷类抗生素,因拥有抗菌谱广、抗菌才干强、用药本钱低、过敏反响少等特质,正在临床上利用万分寻常。目前,最常见的氨基糖苷类抗生素征求庆大霉素、新霉素、链霉素、妥布霉素和阿米卡星等。然则,这类药物拥有较强的耳毒性,也许杀死哺乳动物内耳中的感受毛细胞,导致听力的久远性毁伤。截止目前为止,氨基糖苷类药源性耳聋尚无理念的调理步骤或者药物,是以利用适合的动物模子筛选防治该类疾病的药物显得至合紧要。
哺乳动物内耳中的感受毛细胞是一种终末分裂的细胞,因而不行再生。若何通过技巧伎俩,告竣感受毛细胞的再生,向来是听力筹议范畴的困难之一。2003年,Harris等初次报道,斑马鱼的感受毛细胞正在缺损后存正在再生景色。因而斑马鱼模子正在感受毛细胞再生范畴拥有区别于哺乳动物的怪异上风。通过筹议斑马鱼感受毛细胞再生的机造,有帮于科研职员早日破解哺乳动物感受毛细胞再生这一困难。斑马鱼再生的侧线感受毛细胞多开头于表达Sox2基因的前体细胞。
活体染色是指行使某些无毒或毒性幼的染料,来象征动植物的结构和细胞,然则又不影响其人命行径或爆发任何物理、化学转折以至惹起动植物断命的一种染色技巧。斑马鱼因为体表受精、体表发育,且发育早期胚胎透后,因而极端适合活体染色。除此除表,因为斑马鱼的感受毛细胞对某些异常荧光染料如YO PRO1、FM1-43和FM4-64等拥有选拔吸取性,因而借帮这些荧光染料和成像技巧,可直接对其实行及时调查。
行径学技巧多用于对实习动物的高级中枢神经功效、运动才干和心灵形态等实行评估,可统统反响动物的全体形态。因为斑马鱼的听觉器官位于体表,因而很容易行使行径学技巧对其听觉功效实行检测。这些行径学检测步骤对斑马鱼听觉体系的功效评估来说,既经济又牢靠,相应的技巧容易且有用。由噪声惹起的斑马鱼行径学的转折,可举动一种评估听力的有用步骤。
基因编纂技巧是近年来振起的一种也许对方向基因实行定向“编纂”的技巧。通过该技巧,可告竣对靶标基因的功效筹议。截止目前为止,科研职员已正在斑马鱼模子中涌现了约50种听觉合联基因,这些基因中的很多种同样影响着人类和脊椎动物的内耳。因而行使基因编纂技巧,对斑马鱼的听觉合联基因实行筹议,将拥有紧要道理。利用CRISPR/Cas9技巧修筑的Mtu1基因表达缺陷的斑马鱼。该斑马鱼模子出现出听力贫穷、惊吓反响与拍浮行径格表等。除此除表,上述基因缺陷型斑马鱼内耳中与侧线处毛细胞的数目均显著省略,该筹议为耳聋疾病的发病机造供给了新的表面按照。
转基因技巧是指行使当代生物技巧,将人们希望的方向基因,经由人为分辩、重组后,导入并整合到生物体的基因组中,从而改革生物原有的性状或给予其新的性状的一种技巧。利用转基因技巧,科研职员可告竣斑马鱼听觉器官的特异荧光象征,或修筑听觉合联基因表达缺陷的活体动物模子,为听觉范畴的筹议供给新的实习动物。